免疫亲和

免疫化学中的色谱技术之一

免疫亲和层析(IAFC),也被称为免疫亲和色谱(IAC)[0],是一种基于抗原抗体相互作用的分离系统。免疫亲和层析(IAFC)是一种利用抗原抗体特异性可逆结合特性进行样品净化的技术[1]。它通过将抗体与惰性微珠共价结合后装柱,使抗原溶液经过免疫亲和柱,非目标化合物则沿柱流下,最终使用洗脱缓冲液洗脱出抗原,实现对目标化合物的纯化。这种技术具有很高的提纯效率,通常仅需一次操作即可获得1000至10000倍的纯化效果。

免疫亲和层析(IAFC),也被称为免疫亲和色谱(IAC)[1],是一种基于抗原抗体相互作用的分离系统。

技术原理

免疫亲和层析(IAFC)是一种利用抗原抗体特异性可逆结合特性进行样品净化的技术[2]。它通过将抗体与惰性微珠共价结合后装柱,使抗原溶液经过免疫亲和柱,非目标化合物则沿柱流下,最终使用洗脱缓冲液洗脱出抗原,实现对目标化合物的纯化。这种技术具有很高的提纯效率,通常仅需一次操作即可获得1000至10000倍的纯化效果。

应用与发展

免疫亲和层析(IAFC)最初于20世纪60年代末期由Axen等人提出[3],他们使用溴化氰活化琼脂糖载体来固定抗体。此后,Van等人在1987年首次成功地运用此技术净化了猪肉中的氯霉素,并在1989年扩展到了鸡蛋和牛奶中的氯霉素测定。目前,免疫亲和层析已广泛应用于医药、兽药、食品检测等领域,特别是在兽药残留检测方面,如猪肉中的磺胺类药物、血浆中克仑特罗、血清中二恶英等。此外,在生物样本中,如爱比菌素的应用,免疫亲和层析的回收率可达80%至86%。

优势与挑战

免疫亲和层析(IAFC)作为一种高效的选择性净化技术,能够有效地解决传统样品净化技术中存在的问题,如多步操作、低选择性和易污染等。然而,由于其依赖于抗原抗体之间的特异性结合,对于一些复杂样品中的目标化合物可能无法完全捕获,这限制了其在某些情况下的适用性。

参考资料 3

  1. 食品检测样品预处理--免疫亲和色谱(IAC) — 分析测试百科网
  2. 免疫亲和色谱法的技术原理 — 分析测试百科网
  3. 亲和层析(Affinity Chromatography) — 生物探索
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